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TSZ ELISA试剂盒的原理和实验步骤
发布时间:2018-01-22 11:50:15来源:浏览:856次

TSZ ELISA试剂的原理
TSZ ELISA试剂的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。

TSZ ELISA试剂盒实验步骤整个实验过程应避免阳光直射,将试剂盒平衡至室温。
1.加10ul标准品、样本或质控于相应反应孔中。
2.加50ul新喋呤抗血清于各孔中。
3.加100ul酶联物。
4.用封板纸封板后,室温(20-25℃)振荡(500转/分),90分钟。
5.弃去孔中液体,洗板3次。
6.加200ulTMB底物液于各孔中。
7.室温(20-25℃)避光放置10分钟。
8.以加TMB底物液的顺序加100ul终止液于各孔中。
9.混匀后15分钟内450nm读吸光度。注意:洗涤过程对实验结果是重要的。从标准曲线上可以直接查到样本的结果。样本OD值高于最大的标准品。应将样本用实验缓冲液稀释后检测,结果应乘以稀释倍数。

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